愛滋病檢測:ELISA / W.B. / RT-PCR

(一) 什麼是愛滋病?

愛滋病為免疫缺陷綜合徵 ( Acquired Immune Deficiency Syndrome ),或稱後天免疫缺乏症候群,縮寫為 AIDS,中文音譯為愛滋病。愛滋病是由「愛滋病毒」所引起的疾病,愛滋病毒為人類免疫缺乏病毒 ( Human Immunodeficiency Virus, HIV ) 的簡稱,是一種破壞免疫系統的病毒。

HIV 愛滋病毒主要是攻擊人類的免疫系統,HIV 愛滋病毒進入 CD4 淋巴球之後,會進一步破壞細胞功能,於是細胞數量便逐漸減少。而這類細胞是在保護人體免受病毒、細菌侵害的,因此一旦遭到破壞後,人體免疫力即會下降,伺機性的感染和腫瘤便接踵而至,原本不會造成生病的病菌,變得有機會感染人類,嚴重時會導致病患死亡。

(二) 我是不是得了愛滋病?

感染愛滋病毒 ( HIV ) 之後,通常不會立即發病,初期僅有類似感冒的症狀,例如:無故發燒、身體疲倦、肌肉關節疼痛、咽喉疼痛、體重下降等,經過數個月或數週,症狀消失並進入愛滋病的潛伏期。可能在感染後 6 個月,甚至長達數 10 年或更久才發病。感染 HIV 愛滋病毒的初期 ( 7 – 42 天 ) ( 1 – 6 週 ),尤其是大約第 3 週,超過 50% 病患會出現像感冒、類似傳染性單核球過多症 ( Infectious Mononucleosis-Like ) ( 發燒、紅疹、喉痛、淋巴結腫、無菌性腦膜炎等 ),而後這些症狀消失,患者進入「無症狀」的隱性期或次臨床期。多數患者在 5 – 10 年後發病成為 AIDS ( 即愛滋病 ),愛滋病的相關症狀相當複雜。在臺灣地區患者的症狀,根據臺大醫院的調查,以不明原因的發燒、腹瀉、體重減輕、咳嗽、喘氣、口腔念珠菌等感染最為常見。

提醒您「請勿自行」根據任何症狀 ( 發燒、痠痛、體重下降、疲勞、皮膚疣、皮膚紅疹、類蕁麻疹、噁心、腹瀉、肝功能異常、血小板低下、白血球低下、口腔白斑、淋巴結腫、口腔潰瘍、生殖器潰瘍 ) 來判斷是否得了愛滋病!有任何以上症狀的人,不能自行認定感染了HIV 愛滋病毒。因為每項都可能是由「其他疾病」引起的。通常急性 HIV 愛滋病毒感染者會「同時合併」出現以上 3 – 4 項症狀,不要因為有了 1 – 2 項症狀就窮緊張,也不要因為自我篩檢而輕忽大意。

如果你有高風險性行為,不管有沒有症狀,請您至醫療單位進行檢測 ( 可以免費匿名檢查是否感染了 HIV 愛滋病毒 ),才能真正確定是否感染了 HIV 愛滋病毒。千萬不要靠症狀自行亂猜,那是沒用的,也可能造成恐慌緊張。

(三) 愛滋感染檢測:檢驗愛滋病毒抗體 ( ELISA / W.B. )

愛滋病毒屬濾過性病毒,由於其體積極為微小,現有的檢測方法不能準確檢出病毒存在,但身體會自然產生「抗體」對抗病毒,抗體增長在一段期間後將達至可被驗出的水準,這段期間稱為空窗期,由 2 星期至 3 個月不等,亦有個別例子長達 6 個月,世衛及多數國家政府則採用 3 個月為準。在空窗期間接受愛滋抗體測試,有機會呈假陰性反應,因此必須等待懷疑受感染日起計最少三個月後接受測試,才可得出較準確結果。

簡單整理:

  • 檢驗費用:全台免費匿名篩檢醫院與機構眾多。
  • 檢驗空窗期:6 – 12 週,通常採 3 個月為標準。
  • 檢驗目標:愛滋病毒抗體。

(1) 酵素免疫分析法 ( Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,簡稱 ELISA ):又稱酵素免疫分析法。ELISA可設計出各種不同類型的檢測方式,主要以三明治法 ( Sandwich )、間接法 ( Indirect ) 以及競爭法 ( Competitive ) 三種為主。ELISA 利用抗原抗體之間有專一性的特性進行檢測;即利用抗原所產生的特異抗體進行 2 個層次的結合,最後將酵素呈色,即可顯示特異抗體是否存在。ELISA 的敏感度很高,是目前台灣在初步篩檢時採用最廣泛的一種篩檢方式。

(2) 西方墨點法 ( Western Blot,簡稱 W.B. ):又稱蛋白質轉漬法、免疫墨點法、西式吸印雜交,是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法,也是 HIV 愛滋病毒檢測的方法之一。利用特定抗體能夠專一結合其抗原蛋白質的原理來對樣品進行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表現情況的資訊,來分析檢測特定蛋白質的生物學檢測技術。一般來說,西方墨點法 ( W.B. ) 不會於「初次篩檢」使用,目前都是在前面篩檢出現「陽性或不確定」狀態,才會使用到西方墨點法,以確認是否真的受到感染的事實。

(3) 比較 ELISA & W.B. 檢測法:HIV 愛滋病毒感染的診斷主要仰賴血清抗體檢驗。這可分兩種或兩步驟:一是 ELISA 檢測法,另一則是 Western Blotting 檢測法。通常會以 ELISA 做為第一次篩檢,如果呈「陽性」反應,重複一次 ELISA 若仍然呈現陽性反應時,則以 Western Blot 作為最後確認的方式。若 Western Blot 出現了針對 HIV 特有抗原的抗體反應時,我們便可以確認 HIV 感染。目前全世界篩檢愛滋病毒感染還是以酵素免疫法 ( ELISA ) 為主流,並以西方墨點試驗法 ( W.B. ) 做為確定是否感染愛滋病毒的方式。

愛滋病毒抗體測試一般以「抽取血液」為主,有個別機構則採用「尿液樣本」化驗。以往,血液測試報告需等候 1 天至數天不等,自從民間團體引入新興的快速測試後,愛滋抗體血液結果縮短至幾分鐘至十多分鐘不等。除到指定政府機構、民間志願團體或私立化驗所接受愛滋病抗體測試外,亦可自行到醫療網站訂購價錢大眾化的愛滋病自我檢測器。若測試結果證實為陽性,則必須盡快到政府愛滋病專科就診及定時服藥,切勿延誤醫治。

(四) 愛滋感染檢測:檢測愛滋病毒量 ( HIV RT-PCR )

HIV 是 RNA 病毒,主要是先攻擊人體的 T 淋巴球。簡單說,RT-PCR 是將反轉錄與 PCR 結合,用來檢測 RNA 的方式。在進行 PCR 反應前,先將其 RNA 轉變為第一股的 cDNA,再由此 cDNA 進行增幅作用,即所謂的 RT- PCR。此種方法原先是常常是用來檢測愛滋感染者體內的病毒量。

簡單整理:

  • 檢驗費用:自費約 2,800 – 6,500 元。
  • 檢驗空窗期:10 – 14 天。
  • 檢驗目標:愛滋病毒量。

HIV RT-PCR 檢測的空窗期為 10 – 14 天,HIV RT-PCR 是直接核酸複製技術 Nucleic Acid Technology ( NAT ) 方法,利用截取血漿中 HIV-1 病毒 RNA ( 用來複製病毒蛋白 ) 直接偵測複製後的病毒核酸,而非檢測抗體,此種方法原先是常常是用來檢測愛滋感染者體內的病毒量。以 HIV RT-PCR 法來檢測可縮短空窗時間,且準確率也非常高。HIV RT-PCR 的檢驗可以降低等待空窗期的焦慮,但不管結果如何,空窗期後再去抽血檢驗較為妥當。

一般檢測愛滋病毒的方式是檢視體內是否有 HIV 病毒的蛋白質外鞘,這則是我們常稱的:檢查是否人體已經對愛滋病毒產生了抗體。在空窗期,愛滋病毒的 RNA 並不會干涉正常細胞的 DNA 作用,只是單純的存在於細胞中,這段時間因病毒位進行反轉錄,所以無法檢驗出愛滋病毒蛋白的存在。因此,可藉由抽血進行 RT-PCR,來檢測人體體內是否已存有愛滋病毒的 RNA。所以以 RT-PCR 進行 AIDS 檢驗可說是具有相當高的敏感度。但也由於 PCR 非常敏感,因此造成準確度下降,同時也不被認為是好的愛滋病毒檢測方法,建議還是在空窗期過後重複檢驗,以保心安。

適合做 RT-PCR 的對象:

  • 疑似被愛滋針扎者
  • 自認為有過危險性行為者
  • 經由 ELISA / W.B. 血清抗體法檢驗結果不明者
  • 精神官能恐愛症者
  • 希望一次檢驗就清楚是否有感染 HIV 者

不適合驗 RT-PCR 的對象:

  • 預防性投藥之可能感染者
  • 服用抗 B 肝病毒核酸之藥物者
  • 自體免疫重度異常者

但是 RT-PCR 也有遇到問題的時候,因為有 1% 的人是 HIV 非凡控制者,感染後即使不用靠雞尾酒療法,也可以控制病毒量在測不到的範圍 ( 低於 50 copies / mL ) 至少 1 年以上,因此 10 – 14 天內進行 HIV RT-PCR 檢測可能也無法檢驗出來。根據一些論文研究指出,未被 HIV 愛滋病毒感染以前,沒有人知道自己是不是非凡控制者,依據目前所查閱到的相關研究資料揭漏的訊息,被 HIV 愛滋病毒感染者,有極少數的一部分長期處於無症狀狀態,時間可以長達 10 年甚至 20 年之久。

如果你是 HIV 非凡控制者,你算是幸運的,代表你即使感染了 HIV 愛滋病毒,卻能維持在健康的帶原狀態,可能不會發病。但是為了其他人著想,還是可以在 3 個月後進行抗體檢驗,確認沒有感染 HIV 愛滋病毒,確保沒有傳染給其他人的風險。

Hiv-timecourse

以上圖片顯示:一般情況下未受治療的 HIV 愛滋病毒攜帶者之病毒增長及免疫細胞減少隨時間變化的趨勢圖表 ( 藍線:+ T 淋巴球在每立方公釐 ( 微升 ) 血漿的數量;紅線:HIV 病毒 RNA 在每毫升血漿的複本數量 )。


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